適用范圍和特點:
1. 與目前最常用的轉染試劑相比,轉染效率更高。
2. 可適用于瞬時轉染和穩定轉染。
3. 細胞毒性低,且可通過瞬時轉染增加蛋白表達量。
4. 有血清和無血清培養基均可使用,不受介質變化的影響,且轉染后無需換液。
使用說明:
盡管以下轉染的方法已經充分的驗證過,此試劑具有高效的轉染效率,但針對每種細胞,還是建議試驗人員進行條件優化,通常要考慮以下問題:
1.細胞密度:大多數貼壁細胞密度在 50-70%之間,適合轉染。確定轉染最佳的細胞密度為每一個細胞類型的最大效率和維護密度在所有實驗的重現性。
2.培養環境:含血清的培養基對 UltraFection 3.0 轉染無影響。
3.本產品為-20℃保存,使用前建議分裝凍存,盡量避免多次反復凍存對轉染試劑的影響。
4.DNA 純度和濃度要求:建議選用經過離子交換柱制備的高純度、無菌的 DNA,去除 DNA 中內毒素的污染是保證最大轉染效率的關鍵步驟。以 HEK293 細胞為例,24 孔板最適 DNA 轉染濃度為每孔轉染 0.5μg DNA。
5.UltraFection 3.0 和 DNA 的標準比例是 UltraFection 3.0 :DNA=3:1,即 3μl 的 UltraFection 3.0 對應加入 1μg的 DNA。但是推薦客戶根據實驗需要自行優化范圍,即根據每 1μg DNA 的量調節 UltraFection 3.0 加入的量(2-8μl)。