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          細胞因子的誘導與檢測

          細胞因子常見的檢測方法

          2019-06-24 - 青木生物

          流式細胞術

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          ?????? 流式細胞術生物分析技術的突出特點是在單個細胞水平進行測定,可在同一細胞內同時檢測兩種或更多種細胞因子,可根據細胞免疫表型區分不同的細胞亞群,進行多參數相關分析。

          ?????? 與傳統的熒光鏡檢相比,流式細胞術具有速度快、精度高、準確性好等優點,可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,成為當代先進的細胞定量分析技術。目前流式細胞術儀器和方法的日臻完善,它的應用范圍也日益廣泛,現已普遍用于免疫學、血液學、腫瘤學、細胞生物學、細胞遺傳學和生物化學等臨床醫學和基礎醫學研究領域。

          ?????? 隨著單克隆抗體的發展,以及流式細胞儀檢測方法的不斷完善,采用流式細胞術不但可以對細胞表面的抗原和受體進行分析,對細胞內的抗原或分子也可以進行檢測。現在細胞微球試驗(CBA)技術的出現,使得流式細胞儀可以檢測血清、血漿、培養液上清或其他體液中可溶性蛋白和細胞因子.

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          Bio-Plex 生物分析技術

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          ????? Bio-Plex懸液芯片系統將先進的軟件包、系統檢驗工具、微球耦聯試劑和即用型細胞因子與磷酸化蛋白測試試劑整合在一起,使硬件、軟件和檢測試劑形成一個功能強大的芯片技術平臺,大大提高了結果的精確性和可重復性,使用更加簡便高效。該系統為蛋白與核酸研究人員提供了靈活的復合測試方案,可在單個樣品中同時分析多達100個生物分子。利用100種不同顏色微球(xMAP技術)標記生物分子配體,每個微球可耦聯一個對應不同靶分子的特異反應物。

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          免疫生物分析技術

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          ?????? 細胞因子均為蛋白或多肽,具有較強的抗原性。隨著重組細胞因子的出現,可較方便地獲得細胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體,因此可利用抗原抗體特異性反應的特性,用免疫學技術定量檢測細胞因子,常用的方法包括ELISA、RIA及Western Blot 免疫印跡法。

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          ?????? 盡管細胞因子種類繁多,只要獲得了針對某一因子的特異性抗體(包括多克隆抗體或單克隆抗體)均可采用相似的技術開展工作。免疫學檢測法可直接測定樣品中特定細胞因子的含量(用ng/ml表示),為大規模檢測臨床病人血清中細胞因子的含量提供了方便。本法僅測定細胞因子的抗原性,與該因子活性不一定相平行,因此要了解細胞因子的生物學效應,必須結合生物學檢測法。

          ?????? 使用不同的生物分析技術進行細胞因子檢測,可能結果有些差異,且不同的檢測方法各有優缺點,可以根據實驗目的和實驗室條件進行選擇。在進行細胞因子檢測時,應考慮到細胞因子的作用具有網絡性的特點,需明確檢測方法所測定的細胞因子成分,并考慮其抑制劑和可溶性受體的水平,將各種結合使用,有可能得到較為可靠的結果。

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